[صفحه اصلی ]   [ English ]   مشاهده مقالات :: - 1392/6/10 - جلد:۱۵ - شماره:۳ - 2013/09/1 - Volume:۱۵ - Number:۳ :: زبان مقاله منتشر شده عنوان انگلیسی Inhibitory effect of asymmetric dimethylarginine and NG-Monomethyl-L-arginine methyl ester on nitric oxide synthase activity عنوان فارسی اثر دی متيل آرژينين نامتقارن و ان جی- مونو متيل آرژينين بر مهار فعاليت نيتريک اکسيدسنتاز عنوان مختصر کد مقاله (doi) موضوعات مقاله منتشر شده Biochemistry نوع مقاله منتشر شده Laboratory Study چکیده انگلیسی مقاله Background and Objective: Nitric oxide synthase (NOS) paly a role in nitric oxide (NO) generation. Despite the beneficial effects of NO on different body systems its overproduction of produce reactive nitrogen species (RNS) and nitrosilation of proteins. This study was done to evaluate the effect of asymmetric dimethylarginine (ADMA) and NG-Monomethyl-L-arginine methyl ester (L-NMMA) on inhibition of nitric oxide synthase activity. Materials and Methods: In this laboratory study, Nitric oxide synthase was extracted from 500 grams of sheep kidney by homogenization, ammonium sulphate precipitation and column chromatography on DEAE-32 Cellulose and 2', 5'-ADP-agarose. During purification, protein content was measured according to the Bradford and enzyme activity was assayed using the Griess reactions the inhibitory effects of 25 μΜ concentrations of ADMA and L-NMMA on purified enzyme were determined. Results: Specific activity and yield of NOS were 0.6 units/mg protein and 0.9%, respectively. Molecular weight of purified enzyme was 54 KD with SDS-PAGE. ADMA and L-NMMA in 25 μΜ concentrations reduced enzyme activity by 76 and 61.2%, respectively. Km values for NOS in absence and in presence of ADMA and L-NMMA were 5.32 μM, 31.25 μM (P<0.05) and 14.29 μM (P<0.05), respectively. Vmax for NOS in absence and presence of inhibitors was not changed. Conclusion: ADMA and L-NMMA have competitive inhibitory effect on NOS activity and ADMA have higher inhibitory effect than L-NMMA. چکیده فارسی مقاله زمينه و هدف : نيتريک اکسيد سنتاز (NOS) آنزيمی است که در توليد نيتريک اکسيد (NO) نقش دارد. عليرغم اثرات مفيد NO در سيستم‌های مختلف بدن، توليد بيش از حد آن به خاطر توليد گونه‌های نيتروژن فعال (RNS) و نيتروزيلاسيون پروتئين‌ها، دارای اثرات سمی است. اين مطالعه به منظور تعيين اثر دی متيل آرژينين نامتقارن (ADMA) و ان جی- مونو متيل آرژينين (L-NMMA) بر مهار فعاليت نيتريک اکسيد سنتاز انجام شد. روش بررسی : در اين مطالعه آزمايشگاهی آنزيم NOS طی مراحل هموژنيزاسيون، رسوب با سولفات آمونيوم اشباع و کروماتوگرافی روی ستون‌های DEAE-32 Cellulose و 2',5'-ADP-agarose از 500 گرم بافت تازه کليه گوسفند جدا گرديد. طی مراحل جداسازی ميزان پروتئين به روش برادفورد و فعاليت آنزيم NOS به روش گريس اندازه‌گيری شد و اثرات مهار کنندگی ADMA و L-NMMA در غلظت 25 ميکرومولار بر فعاليت NOS تعيين گرديد. يافته‌ها : فعاليت ويژه و بازده خالص‌سازی NOS به ترتيب 0.6 واحد بر ميلی‌گرم پروتئين و 0.9% به‌دست آمد. وزن ملکولی آنزيم با استفاده از SDS-PAGE ، KD 54 حاصل شد. ADMA وL-NMMA در غلظت‌های 25 ميکرو مولار موجب کاهش فعاليت آنزيم به ترتيب در حدود 76 درصد و 61.2% گرديد. ميزان Km آنزيم NOS در غياب و در حضور ADMA و L-NMMA به ترتيب 5.32 ميکرومول، 31.25 ميکرومول (P<0.001) و 14.29 ميکرومول (P<0.001) به دست آمد و در Vmax آنزيم NOS در غياب و يا در حضور اين ترکيبات تغييری ايجاد نشد. نتيجه‌گيری : ADMA و L-NMMA دارای اثر بازدارندگی رقابتی بر فعاليت آنزيم NOS بوده و ADMA در مقايسه با L-NMMA دارای قدرت بازدارندگی بيشتری است. کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Nitric oxide synthase, Asymmetric dimethyl Arginine, NG-monomethyl-L-arginine methyl ester, Kidney کلیدواژه‌های فارسی مقاله نيتريک اکسيد سنتاز ، دي متيل آرژينين نامتقارن ، ان جي- مونو متيل آرژينين ، کلیه صفحه آغاز مقاله در نشریه ۸۴ صفحه پایان مقاله در نشریه ۹۲ نشانی اینترنتی http://www.goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-686&slc_lang=fa&sid=fa فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است نویسندگان مقاله 6540---6541---6542---6543---6544--- برای برگشت به بخش مقاله‌های منتشر شده اینجا را کلیک كنید. Persian site map - English site map - Created in 0.09 seconds with 16 queries by YEKTAWEB 4766